芦丁的色谱纯度为90.5%

3、高效标准品引入的液相不确定度

（1）标准品的纯度引入的不确定度

根据标准物质证书的标示，芦丁的色谱纯度为90.5%，其最大允许误差为±0.5%，法测按矩形分布，定槐的不度评定则标准不确定度计算结果如下：

（2）标准品的米中称量引入的不确定度

根据使用的电子天平检定证书，其最大允许误差为±0.01mg，芦丁称取标准品量为5.4mg，确定由称量引入的高效不确定度可按B类评定，按矩形分布考虑，液相包含因子k=根号3，色谱则其相对标准不确定度为：
 

（3）标准储备液的法测配制

根据JJG196—2006《常用玻璃量具检定规程》，A级50mL容量瓶最大允差为±0.05mL，定槐的不度评定按B类评定，米中按照矩形分布考虑，芦丁k=根号3，相对不确定度为：

合成标准品引入的相对不确定度：

4、标准曲线的拟合引入的不确定度

精密吸取芦丁对照品溶液（0.0979mg/mL）4、6、8、10、12、14μL，分别测定峰面积，每一浓度测定3次，计算平均峰面积，测定结果见表2。用最小二乘法拟合芦丁浓度（x）-峰面积（y）曲线，得到曲线方程：y=21969202x-42796（r=0.9999，n=6），即拟合曲线的斜率b和截距a分别为21969202和-42796。

标准曲线的标准偏差为：

实际测定中，对被测样品测定2次（p=2），平均响应值为1646039，代入拟合曲线，测得供试液中芦丁的估计值为X₀=0.0768g/L，得到标准曲线的相对标准不确定度u_rel（Std）为：

5、仪器测量重复性引入的不确定度

根据岛津高效液相色谱仪检定证书，定量测量重复性误差为1％，按均匀分布计算，则液相色谱仪的相对标准测量不确定度为：

6、计算合成标准不确定度

根据各分量的计算结果（见表3），合成相对标准不确定度：

7、扩展不确定度与测试结果报告

当置信水平P=95%（k=2）时，则相对扩展不确定度U95（y）=urel（y）×k=0.0147×2=0.0294。根据数学模型计算得到样品中芦丁的含量为：X=18.38%，故其扩展不确定度为：u=18.38%×0.0294=0.54%，测定结果报告为：y=（18.38±0.54）%，k=2。

三、结论

本文采用高效液相色谱法测定槐米中芦丁的含量，通过含量测定不确定度的评定，得知该方法的不确定度主要来源于样品制备均匀度，其次为标准曲线的拟合，而最小的分量是标准品引入的不确定度。实验中的测定结果都会产生不确定度，不确定度的大小反映测试结果的可靠性，只有出具不确定度值，测试结果才算完整有意义。因此，在槐米中芦丁的日常测定中可通过控制样品制备过程和标准曲线拟合过程，降低测定不确定度，提高测定结果的准确性。

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